Science: How we measure daily energy levels with saliva cortisol

Mokslinio pagrįstumo santrauka

Toliau pateikiama mokslinio pagrįstumo aspektų santrauka. Visą straipsnį su visomis mokslinėmis nuorodomis rasite žemiau.

Fiziologinis pagrindas (ką tai matuoja)

• Seilių kortizolis atspindi biologiškai aktyvią (laisvąją) kortizolio frakciją kraujyje, nes laisvasis kortizolis difunduoja į seiles, todėl tai yra patikimas, neinvazinis HPA ašies (t. y. biologinės sistemos, sukeliančios kortizolio išsiskyrimą) aktyvumo kasdieniame gyvenime rodiklis (Vining et al., 1983; Kirschbaum & Hellhammer, 1994).
  

Analitinis pagrįstumas: specifiškumas (ar galime tai išmatuoti?)

• Aukštos kokybės seilių imunoanalizės metodai, kuriuos naudoja „Sapiens“ partnerė „Dresden Lab Services“ laboratorija, prižiūrima prof. Clemenso Kirschbaumo, yra sukurti taip, kad pasižymėtų mažu kryžminiu reaktyvumu su giminingais steroidais; alternatyviai „Sapiens“ diagnostikoje gali būti naudojama LC–MS/MS technologija, kuri užtikrina dar didesnį specifiškumą, atskirdama kortizolį nuo metabolitų ir egzogeninių steroidų (Casals & Hanzu, 2020).
• „Sapiens“ naudoja standartizuotą surinkimo priemonę („Salivette®“) ir atsižvelgia į pagrindinius trikdžius per savęs vertinimo anketą (pvz., gliukokortikoidų vartojimą / užteršimą), kad sumažintų iškraipymų riziką
  

Analitinis pagrįstumas: jautrumas ir tikslumas (ar galima aptikti visą diapazoną?)

• Seilių kortizolio tyrimai patikimai kiekybiškai įvertina visą cirkadinį svyravimą – nuo labai mažų verčių vėlai vakare iki piko po pabudimo – su moksliniams tyrimams būdingu tikslumu (Hellhammer et al., 2009; Raff et al., 1998).
• Pakartotinis mėginių ėmimas per 2–3 dienas, kaip atliekama „Sapiens“ diagnostikoje, sumažina atsitiktinį biologinį kintamumą dienų bėgyje ir pagerina individualaus profilio stabilumą (Sørensen et al., 2021).
  

Klinikinis ir koreliacinis pagrįstumas (ar tai atitinka tikrąją fiziologiją ir būkles?)

• Seilių kortizolis tiksliai atspindi serumo laisvojo kortizolio dinamiką atliekant endokrininius tyrimus ir vertinant cirkadinius svyravimus, o tai patvirtina stiprų biologinį pagrįstumą (Vining et al., 1983; Hellhammer et al., 2009).
• Vėlyvo vakaro seilių kortizolio tyrimas yra kliniškai patvirtintas hiperkortizolizmo (pvz., Kušingo sindromo) patikrai, pasižymintis patikimais diagnostiniais rezultatais medicininėje praktikoje (Nieman et al., 2008; Raff et al., 2012).
  

Streso ir sveikatos sąsajos (ką šie rodikliai reiškia kasdieniame gyvenime)

• Kortizolio atsakas pabudus (CAR) ir paros kreivės nuolydis yra nuosekliai siejami su lėtiniu stresu, perdegimo ar nuovargio fenotipais bei platesniais psichinės ir fizinės sveikatos rodikliais (Chida & Steptoe, 2009; Adam et al., 2017).
• Šie rodikliai suteikia objektyvų kontekstą streso fiziologijai, kai yra vertinami kartu su simptomais ir gyvenimo būdo veiksniais, kaip tai daroma atliekant Sapiens diagnostiką
  

Interpretacija: laikas ir protokolo laikymasis (kodėl mėginių paėmimo tvarka yra svarbi)

• Kortizolio lygis labai priklauso nuo laiko; vėluojant paimti „pabudimo“ mėginius, CAR rodiklis gali būti dirbtinai sumažintas, todėl griežtas laiko laikymasis yra būtinas ir pabrėžiamas vaizdo įraše bei rašytinėse instrukcijose, kurias gauna Sapiens klientai (Okun et al., 2010; Stalder et al., 2016).
• Sapiens fiksuoja pagrindinius ritmo ypatumus naudodama pabudimo, +30 min.ir prieš miegą mėginius per 2 iš eilės einančias įprastas darbo dienas (arba 3 dienas, kai reikia), laikantis bendrų rekomendacijų (Stalder et al., 2016).
  

Mėginių paėmimas namuose ir stabilumas transportavimo metu (ar žmonės gali tai patikimai atlikti namuose?)

• Tyrimai rodo, kad mėginių paėmimas namuose yra lengvai įgyvendinamas ir pasižymi geru laiko laikymusi; vidurkinimas per kelias dienas padidina patikimumą (Sørensen et al., 2021).
• Seilėse esantis kortizolis išlieka stabilus įprastais siuntimo laikotarpiais, todėl paštu siunčiami mėginiai yra tinkamas darbo metodas (Garde & Hansen, 2005; Clements & Parker, 1998).
  

Apribojimai ir apsaugos priemonės (kas gali iškraipyti rezultatus)

• Ūminės būklės (miego sutrikimai, ligos, alkoholis), kraujo priemaišos iš dantenų ir vaistai – ypač egzogeniniai gliukokortikoidai – gali iškraipyti rodmenis; šie veiksniai yra įvertinami ir atsižvelgiami interpretacijos metu.
• „Sapiens“ nėra medicinos prietaisas ir nenustato ligų diagnozių, tačiau šis protokolas sukurtas remiantis medicininio lygio metodais bei konservatyviu, įrodymais pagrįstu vertinimu.

‍

Analitinis pagrindimas

‍Kortizolio matavimas seilėse pagrįstas principu, kad biologiškai aktyvi kortizolio dalis (nesusijungusi su kortizolį jungiančiu globulinu) difunduoja į seiles, todėl tai yra neinvazinis laisvojo kortizolio kiekio kraujyje rodiklis. Išsamūs tyrimai patvirtino, kad kortizolio kiekis seilėse glaudžiai koreliuoja su laisvojo kortizolio kiekiu serume įvairiomis sąlygomis, įskaitant dinaminius endokrininius tyrimus ir paros svyravimus (Vining ir kt., 1983). Tiesą sakant, ankstyvieji lyginamieji tyrimai parodė, kad kortizolis seilėse gali būti tinkamesnis antinksčių žievės funkcijos rodiklis nei bendras kortizolio kiekis serume, nes jis tiesiogiai atspindi biologiškai aktyvų hormoną ir yra lengvai surenkamas be streso (Vining ir kt., 1983). Vėlesni darbai patvirtino, kad kortizolio kiekis seilėse yra pagrįstas ir patikimas laisvojo kortizolio serume pakaitalas įvairiuose kontekstuose (Kirschbaum & Hellhammer, 1994). Šis tvirtas fiziologinis pagrindas yra „Sapiens“ metodo, kuriuo naudojamasi tiriant pogumburio-hipofizės-antinksčių (HPA) ašies aktyvumą kasdieniame gyvenime per kortizolio profilį seilėse, pagrindas.

Analitinis specifiškumas

‍Šiuolaikiniai analitiniai metodai, kuriuos seilių kortizolio tyrimams naudoja ir „Sapiens“ partnerių laboratorija „Dresden Lab Services“, pasižymi itin dideliu specifiškumu. Seilėms skirti fermentiniai imuniniai (EIA) ir chemiliuminescenciniai imuniniai tyrimai yra sukurti taip, kad būtų sumažintas kryžminis reaktyvumas su struktūriškai giminingais steroidais (pvz., kortizonu ar kortikosteronu). Pavyzdžiui, tipinis aukštos kokybės seilių kortizolio EIA tyrimas pasižymi mažu kryžminiu reaktyvumu su kortizonu (apie kelis procentus) ir nereikšmingu kryžminiu reaktyvumu su kitais antinksčių steroidais, todėl užtikrinama, kad matavimas daugiausia atspindi patį kortizolį (Casals & Hanzu, 2020).

Pažymėtina, kad skysčių chromatografija su tandemine masės spektrometrija (LC–MS/MS) užtikrina dar didesnį analitinį specifiškumą, fiziškai atskirdama kortizolį nuo kitų junginių. LC–MS/MS pašalina metabolitų ar egzogeninių steroidų keliamus trukdžius (Casals & Hanzu, 2020) ir tapo etaloniniu standartu specializuotose laboratorijose, tokiose kaip „Dresden Lab Services GmbH“. Pagal nutylėjimą ir dėl kaštų priežasčių „Sapiens“ diagnostikoje taikomas imuninio tyrimo metodas, tačiau klientai gali specialiai pageidauti atlikti analizę naudojant LC-MS/MS.

Skirtingai nei bendras kortizolio kiekis serume, kuriam įtakos gali turėti jungiamųjų baltymų pokyčiai (pvz., CBG padidėjimas nėštumo metu ar vartojant estrogenus), seilių kortizoliui CBG įtakos neturi, todėl jis tiksliau atspindi HPA ašies veiklą (Vining et al., 1983). Imuninių tyrimų rinkiniuose naudojami antikūnai yra kruopščiai atrenkami dėl didelio giminingumo kortizoliui ir mažo kryžminio reaktyvumo. Pavyzdžiui, nustatyta, kad vienas plačiai naudojamas seilių kortizolio ELISA tyrimas pasižymi <0,1 % kryžminiu reaktyvumu su struktūriškai giminingais steroidais, tokiais kaip DHEA, androstendionas ir testosteronas, ir tik ~3 % su kortizonu (neaktyviu kortizolio metabolitu). Toks specifiškumas reiškia, kad įprasti endogeniniai steroidai ar dažnai vartojami vaistai dirbtinai nepadidina išmatuoto kortizolio kiekio. Vis dėlto, tam tikri sintetiniai gliukokortikoidai (pvz., prednizolonas) gali sukelti kryžminę reakciją imuniniuose tyrimuose arba būti aptikti masės spektrometrijos metodu, todėl interpretuojant rezultatus būtina atsižvelgti į egzogeninių steroidų vartojimą (Casals & Hanzu, 2020). „Sapiens“ naudojami analitiniai metodai parenkami taip, kad būtų išvengta žinomų trukdžių. Visų pirma, jei tiriamasis vartoja vietinio poveikio ar inhaliuojamąjį hidrokortizoną, atsižvelgiama į dozių laiką ir galimą seilių užteršimą, nes egzogeninis hidrokortizonas seilėse gali būti užfiksuotas kaip kortizolis. Kai tokių trikdančių veiksnių nėra, seilių tyrimai tiksliai izoliuoja kortizolį: tyrimai parodė, kad net ir esant pakitusiai kortizolio apykaitai, seilių kortizolis atitinka laisvąją frakciją. Pavyzdžiui, Kirschbaum ir Hellhammer (1994) pažymi, kad seilių matavimai glaudžiai atitinka laisvojo kortizolio kiekį serume streso sąlygomis ir cirkadinių pokyčių metu, o tai patvirtina aukštą analitinį specifiškumą laisvajam hormonui (Kirschbaum & Hellhammer, 1994). Be to, „Sapiens“ surinkimo protokole naudojamas „Sarstedt Salivette®“ įrenginys padidina specifiškumą ir patikimumą – sintetinis tamponas sukurtas kiekybiniam kortizolio surinkimui be reikšmingų adsorbcijos nuostolių ar trukdžių išplovimo. Apibendrinant, specifinės imunochemijos (arba masės spektrometrijos) ir optimizuotų surinkimo priemonių derinys užtikrina, kad „Sapiens“ atliekami seilių kortizolio matavimai itin specifiškai atspindi tikrąjį kortizolio lygį.

Analitinis jautrumas‍

Seilių kortizolio tyrimai yra itin jautrūs ir gali aptikti šį hormoną net esant labai mažai jo koncentracijai. Tai būtina, nes kortizolio kiekis kinta pagal ryškų paros ritmą, svyruojantį net dešimteriopai: lygis pasiekia piką netrukus po pabudimo ir nukrenta iki žemiausio taško nakties metu. Pavyzdžiui, sveiko žmogaus seilių kortizolio kiekis vidurnaktį gali siekti apie 1–4 nmol/l, o ryte, pabudus, jis gali būti 10–20 nmol/l ar didesnis (Mantanus et al., 2015). Imunofermentiniai tyrimai (ELISA) ištobulėjo tiek, kad lengvai aptinka ir tokias žemas koncentracijas. Pavyzdžiui, „Salimetrics©“ seilių kortizolio ELISA tyrimo apatinė jautrumo riba yra apie 0,33 nmol/l (Salimetrics, techninių duomenų lapas), o dažnai naudojamo „DRG International“ ELISA tyrimo validacijos metu nustatyta aptikimo riba siekė ~0,5 nmol/l (pagal FDA 510k duomenis).

Dėl tokio jautrumo net ir itin mažas kortizolio kiekis (koks gali būti esant antinksčių nepakankamumui arba paros ritmo žemiausiame taške) yra atskiriamas nuo tyrimo triukšmo. Praktikoje tyrimai rodo, kad kortizolį galima išmatuoti praktiškai visuose įprastu laiku surinktuose seilių mėginiuose – net ir vėlyvą naktį paimti sveikų asmenų mėginiai dažniausiai viršija nulinę tyrimo kalibratoriaus vertę (Yaneva et al., 2019). Siekiant dar didesnio analitinio specifiškumo ir jautrumo, LC–MS/MS metodai parodė 10 ng/dl funkcinį jautrumą seilių kortizoliui (≈0,28 nmol/l) bei platų tiesinį matavimo diapazoną, leidžiantį tiksliai kiekybiškai įvertinti net labai mažas koncentracijas (Sturmer et al., 2018).

Be apatinių ribų, dinaminis diapazonas seilių tyrimuose apima ir ūminio streso reakcijas. Fiziologiniai kortizolio šuoliai (pavyzdžiui, psichosocialinio streso testų metu) kai kuriems asmenims gali padidinti seilių kortizolio kiekį iki 30–40 nmol/l; imunofermentiniai tyrimai išlieka tiesiniai šiame ir didesniame diapazone (paprastai iki ~80 nmol/l, prieš prireikiant skiedimo). Analitinis tikslumas taip pat yra gerai ištirtas: tyrimai rodo, kad seilių kortizolio variacijos koeficientas (CV) atliekant tyrimą vienu metu (intra-assay) yra apie 4–7 %, o atliekant skirtingu metu (inter-assay) – apie 8–11 % (Hellhammer ir kt., 2009). Šis tikslumo lygis yra palyginamas su serumo kortizolio tyrimų tikslumu. Tai reiškia, kad kasdienius biologinius kortizolio svyravimus (kurie dažnai būna daug didesni) galima patikimai atskirti nuo analitinio „triukšmo“. Iš tiesų, viename neseniai atliktame tyrime namų sąlygomis nustatyta, kad individualus kasdienis kortizolio rodiklių kintamumas (CV ~15–20 % rytiniam AUC) viršijo žinomą analitinį CV, o tai pabrėžia, kad metodo atkuriamumą pirmiausia riboja biologiniai veiksniai, o ne tyrimo netikslumas (Sørensen ir kt., 2021). „Sapiens“ sistemoje mėginiai analizuojami CLIA sertifikuotose laboratorijose, taikant griežtą kokybės kontrolę, įskaitant kalibravimo patikras ir kontrolinių mėginių su maža, vidutine bei didele kortizolio koncentracija įtraukimą, siekiant patikrinti jautrumą ir tikslumą. Bendrai paėmus, įrodymai patvirtina, kad seilių kortizolio tyrimai užtikrina daugiau nei pakankamą jautrumą ir patikimumą, leidžiantį nustatyti subtilius paros pokyčius ir dinaminį HPA ašies atsaką.

Apskritai, seilių kortizolio nustatymo metodai yra pakankamai jautrūs, kad būtų galima užfiksuoti visą cirkadinį dinaminį diapazoną – nuo vėlyvo vakaro minimumo iki staigaus padidėjimo pabudus – kai naudojami patvirtinti tyrimo metodai ir standartizuotas mėginių ėmimas. Klasikiniai klinikiniai duomenų rinkiniai rodo mažą koncentraciją vėlyvą vakarą ir žymiai didesnes vertes ryte, o tai atitinka vienos eilės dydžio svyravimą per dieną. (Raff ir kt., 1998) (Aardal & Holm, 1995) (Shin ir kt., 2011).

‍

‍

‍

Koreliacinis ir asociatyvinis pagrįstumas

Sąsaja su serumo kortizoliu ir HPA ašies būkle

‍Seilių kortizolio pagrįstumą patvirtina stiprios koreliacijos su serumo kortizolio dinamika ir nusistovėjusiais endokrininiais tyrimais. Kaip minėta, seilių kortizolio lygis kyla ir krinta lygiagrečiai su laisvuoju plazmos kortizoliu esant įvairiems dirgikliams. Pavyzdžiui, atliekant AKTH stimuliacijos testus, seilių kortizolio padidėjimas glaudžiai atitinka kraujo kortizolio padidėjimą, o tai patvirtina, kad seilių matavimai tiksliai atspindi antinksčių veiklos pokyčius (Vining ir kt., 1983). Panašiai, deksametazono sukeltas kortizolio slopinimas seilėse yra toks pat ryškus kaip ir serume – tai svarbus aspektas klinikinio patikros vertinimo požiūriu. Išsami Hellhammer ir kt. (2009) apžvalga „kortizolio tyrimas seilėse pasirodė esąs pagrįstas ir patikimas atitinkamo nesusijungusio hormono kiekio kraujyje atspindys“, patvirtinanti, kad kortizolis seilėse gali pakeisti laisvąjį kortizolį serume tiek moksliniuose tyrimuose, tiek klinikinėje praktikoje (Hellhammer ir kt., 2009). Šis klinikinis specifiškumas – reiškiantis, kad matavimas tiksliai atspindi individualią asmens kortizolio būklę – yra endokrinologinės diagnostikos pagrindas. Pavyzdžiui, vėlyvo vakaro kortizolio tyrimas seilėse (LNSC) dabar yra nusistovėjęs pirminės patikros metodas Kušingo sindromui nustatyti. Pacientams, sergantiems Kušingo sindromu (patologinis hiperkortizolizmas), LNSC rodikliai naktį beveik visada yra padidėję, o sveikų ar net nutukusių patiriančių stresą asmenų rodikliai išlieka labai žemi. Pranešama, kad LNSC diagnostinis tikslumas yra puikus: tyrimai rodo ~92 % jautrumą ir ~96 % specifiškumą Kušingo sindromui nustatyti naudojant tinkamas ribines vertes (Castinetti ir kt., 2019; Raff ir kt., 2012). Tai reiškia, kad kortizolio tyrimas seilėse dideliu tikslumu padeda nustatyti pacientus, sergančius endogeniniu hiperkortizolizmu, ir įrodo savo klinikinį pagrįstumą diagnozuojant šį sunkų endokrininį sutrikimą.

Sąsajos su psichosocialiniu stresu ir sveikata

‍Be klasikinių endokrininių ligų, kortizolio profiliai seilėse buvo plačiai tiriami siejant juos su su stresu susijusiomis būklėmis ir psichosocialiniais kintamaisiais. Kortizolio atsakas pabudus (CAR) – kortizolio šuolis praėjus ~30 minučių po pabudimo – yra svarbus rodiklis šiuo atžvilgiu. Sisteminga metaanalizė, kurią atliko Chida ir Steptoe (2009) išanalizavo 62 tyrimus ir nustatė, kad kortizolio atsakas pabudus (CAR) yra teigiamai siejamas su lėtiniu gyvenimo stresu ir su darbu susijusiais veiksniais, tačiau neigiamai siejamas su nuovargio, perdegimo ir išsekimo būsenomis (Chida & Steptoe, 2009). Kitaip tariant, asmenys, patiriantys didesnį nuolatinį stresą, dažniau pasižymi padidėjusiu CAR (didesniu kortizolio šuoliu ryte), o tie, kurie kenčia nuo su stresu susijusio išsekimo (pvz., klinikinio perdegimo ar PTSD), dažnai pasižymi nuslopintu CAR. Šios išvados patvirtina klinikinį jautrumą seilių kortizolio profilių: šis rodiklis yra jautrus diferencijuojant skirtingas su stresu susijusias būkles. Panašiai daugybė tyrimų sieja plokštesnius paros kortizolio kreivės nuolydžius (t. y. mažesnį kortizolio lygio kritimą nuo ryto iki vakaro) su neigiamais sveikatos padariniais. Neseniai atliktoje 80 tyrimų metaanalizėje Emma Adam su kolegomis (2017) patvirtino, kad plokštesnis paros kortizolio kreivės nuolydis yra reikšmingai susijęs su prastesne psichine ir fizine sveikata vertinant įvairius rodiklius (Adam et al., 2017). Pažymėtina, kad stipriausi ryšiai buvo nustatyti tarp pakitusio kortizolio ritmo ir uždegiminių procesų bei imuninės sistemos sutrikimų (Adam et al., 2017), kas rodo, kad nenormalus kortizolio profilis gali būti lėtinio streso poveikio biomarkeris, turintis neigiamų pasekmių sveikatai. Šie tvirti ryšiai rodo, kad seilių kortizolis pasižymi sąsajos pagrįstumu vertinant realias klinikines ir psichosocialines būsenas: duomenų modeliai prasmingai koreliuoja su diagnozėmis (depresija, perdegimu, Kušingo sindromu ir kt.) bei rizikos veiksniais (streso poveikiu, žemu socialiniu ir ekonominiu statusu ir kt.).

Klinikinių būklių atskyrimas

‍„Sapiens“ seilių kortizolio metodikos pagrįstumą dar labiau patvirtina jos gebėjimas atskirti klinikines grupes. Pavyzdžiui, lyginamajame tyrime, kuriame dalyvavo profesinio perdegimo sindromą turintys asmenys ir sveiki kontrolinės grupės atstovai, seilių kortizolio rodikliai visą dieną buvo žymiai aukštesni perdegimą patiriančiųjų grupėje (Pilger et al., 2018). Įdomu tai, kad šis skirtumas buvo ryškiausias dienos viduryje ir vėlai vakare, kai perdegimą patiriančių asmenų kortizolio lygis išliko padidėjęs, palyginti su kontrolinės grupės asmenimis, o rytiniai rodikliai tarp grupių skyrėsi mažiau (Pilger et al., 2018) – tai pabrėžia, kad lėtinis stresas gali pasireikšti nesugebėjimu sumažinti kortizolio kiekio dienos pabaigoje. Be to, po reabilitacijos programos perdegimą patyrusiems pacientams kortizolio lygis dienos viduryje ir vakare reikšmingai sumažėjo, kartu pagerėjo streso ir depresijos rodikliai (Pilger et al., 2018). Šie pokyčiai, nustatyti tiriant seilių kortizolį, atspindi klinikinį pagerėjimą, suteikdami patikimumo šiam matavimo metodui reakcija į intervencijas. Panašiai, kai kurių tyrimų duomenimis, pacientams, sergantiems didžiąja depresija, būdingas arba padidėjęs kortizolio atsakas pabudus (CAR), arba suplokštėjusi paros kreivė (priklausomai nuo depresijos potipio). Tai patvirtina idėją, kad HPA ašies disfunkcija yra depresijos požymis, kurį galima nustatyti tiriant seilių kortizolį. Apibendrinant galima teigti, kad tiek endokrinologijos klinikoje (tikrinant dėl Kušingo sindromo), tiek vertinant stresą darbe ar psichiatrijos srityje, seilių kortizolio profiliavimas pasižymi pakankamu jautrumu ir specifiškumu, kad atspindėtų klinikinę būklę. „Sapiens“ metodas naudoja šį patvirtintą biomarkerį kaip integruoto vertinimo dalį, remdamasis dešimtmečius trukusiais koreliaciniais tyrimais, siejančiais seilių kortizolį su reikšmingais klinikiniais rodikliais.

‍

‍

‍

Interpretacinis ir kontekstinis naudingumas

Fiziologinis kontekstas ir laikas

‍Norint teisingai interpretuoti seilių kortizolio tyrimo rezultatus, būtina atsižvelgti į mėginių paėmimo kontekstą, ypač į paros laiką. Kortizolio sekrecija vyksta pagal cirkadinį ritmą: jo lygis yra žemiausias naktį, pradeda kilti likus maždaug 2–3 valandoms iki pabudimo ir pasiekia piką per pirmąsias 30–45 minutes po pabudimo (CAR), o vėliau per dieną palaipsniui mažėja. „Sapiens“ taiko standartizuotą mėginių paėmimo protokolą, skirtą pagrindiniams šio ritmo ypatumams užfiksuoti. Konkrečiai, dalyviai surenka tris seilių mėginius per dieną dvi dienas iš eilės įprastomis darbo dienomis – iškart pabudus, praėjus 30 minučių po pabudimo ir apie 22:00 val. (prieš miegą). Šis laikas pasirinktas vadovaujantis tarptautinėmis kortizolio ritmo vertinimo gairėmis (Stalder et al., 2016). Mėginiai, paimti iškart ir praėjus 30 minučių po pabudimo, leidžia kiekybiškai įvertinti CAR (kortizolio pokytį arba padidėjimą po pabudimo), o vakarinis mėginys parodo paros minimumą ir leidžia apskaičiuoti paros kreivės nuolydį nuo rytinio piko iki nakties. Mėginių paėmimas dvi darbo dienas leidžia įvertinti dienos svyravimus ir išvengti netipinių modelių, kurie gali pasireikšti savaitgaliais ar poilsio dienomis (Kunz-Ebrecht et al., 2004). Iš tiesų, daugeliui žmonių CAR dydis darbo dienomis ir savaitgaliais gali skirtis – poilsio dienomis jis dažnai būna mažesnis dėl vėlesnio kėlimosi ar sumažėjusio anticipacinio streso. Todėl dviejų iš eilės einančių įprastų dienų vertinimas padidina kortizolio profilio reprezentatyvumą asmens įprastoje aplinkoje.

Kortizolio atsako pabudus interpretacija

‍Kortizolio atsakas į pabudimą (CAR) yra dinaminis HPA ašies reaktyvumo rodiklis; normalus CAR paprastai yra ~50–75 % (arba 5–10 nmol/l absoliučiais dydžiais) didesnis už kortizolio lygį pabudus, o didžiausią vertę pasiekia praėjus maždaug 30 minučių po pabudimo. Manoma, kad šis sveikas CAR paruošia organizmą artėjančiai dienai ir yra jautrus psichosocialiniams veiksniams. Interpretuojant „Sapiens“ rezultatus, padidėjęs CAR (gerokai didesnis nei vidutinis) gali būti vertinamas kaip didelio anticipacinio streso požymis arba fenotipas, susijęs su darbe patiriama įtampa. Pavyzdžiui, asmenys, nurodantys lėtinį stresą darbe ar didelius darbo krūvius, dažnai pasižymi stipresniu CAR, palyginti su mažiau streso patiriančiais asmenimis (Chida & Steptoe, 2009). Priešingai, susilpnėjęs arba neegzistuojantis CAR (nedidelis padidėjimas arba jo nebuvimas pabudus) gali rodyti HPA ašies disfunkciją, susijusią su išsekimu ar perdegimu; tyrimai sieja plokščius CAR profilius su lėtinio nuovargio ir perdegimo sindromais (Chida & Steptoe, 2009). Visgi svarbu įsitikinti, kad mažas CAR nėra techninės klaidos rezultatas (pvz., netinkamu laiku paimtas mėginys – žr. toliau). Todėl „Sapiens“ susieja objektyvius kortizolio tyrimų duomenis su asmens nurodytais streso lygiais ir simptomais, kad būtų suformuota nuosekli interpretacija. Didelis CAR asmeniui, jaučiančiam perdegimą, gali patvirtinti aukšto streso reaktyvumo fiziologiją, o plokščias CAR asmeniui, turinčiam perdegimo simptomų, gali sustiprinti HPA ašies susilpnėjimo įspūdį. Priešingai, plokščias CAR bendrai sveikam, gerai besitvarkančiam asmeniui gali paskatinti ištirti mėginių ėmimo tikslumą ar kitus veiksnius, nes tai būtų netikėta.

Paros ritmo nuolydžio ir vakarinio lygio interpretacija

‍Kortizolio paros ritmo nuolydis (mažėjimas nuo ryto iki vakaro) yra dar vienas svarbus interpretacijos aspektas. Status, ryškus nuolydis (aukštas lygis ryte, žemas vakare) paprastai laikomas sveiku modeliu, rodančiu tvirtą cirkadinę moduliaciją ir efektyvų kortizolio lygio sumažėjimą dienos pabaigoje. Plokštesnis nuolydis – kai vakarinis kortizolio lygis yra nepagrįstai aukštas arba mažėjimas yra lėtas – interpretuojamas kaip galimas lėtinio streso poveikio arba sutrikusios cirkadinės reguliacijos rodiklis. Plokštesni nuolydžiai buvo susieti su daugybe neigiamų pasekmių, įskaitant prastesnę psichinę sveikatą, sisteminį uždegimą, širdies ir kraujagyslių ligų riziką bei tam tikrose populiacijose netgi mirtingumą (Adam et al., 2017). Todėl, jei „Sapiens“ dalyvio rezultatai rodo plokštesnę nei įprasta kreivę per dvi dienas (pvz., kortizolio lygis vakare išlieka padidėjęs arba krenta tik nežymiai), tai gali rodyti padidėjusį alostatinį krūvį arba nepakankamą atsistatymą po kasdienių stresorių. Toks modelis gali būti vertinamas individualiame kontekste: pavyzdžiui, ar asmuo dirba vėlai, ar vakare patiria įkyrias mintis, kurios gali palaikyti aukštą kortizolio lygį? Kita vertus, pernelyg staigus kritimas (kartu su mažu bendru kortizolio kiekiu) kai kuriais atvejais gali rodyti nepakankamą HPA ašies aktyvumą arba antinksčių išsekimą (nors „antinksčių išsekimo“ sąvoka yra prieštaringa ir nėra oficiali medicininė diagnozė, nuosekliai mažas kortizolio kiekis gali būti pagrindas medicininiam nepakankamumo įvertinimui). Paprastai „Sapiens“ kortizolio rodiklius vertina atsižvelgdama į norminius duomenis ir klinikinius tyrimus. Pavyzdžiui, vakarinis kortizolio lygis, viršijantis, tarkime, 5 nmol/l, yra neįprastai aukštas ramybės būsenai ir gali būti pažymėtas kaip „padidėjęs vakarinis kortizolis“, o vakarinis lygis, žemesnis nei 1 nmol/l, yra labai mažas (galbūt stebimas žmogui, kuris yra labai atsipalaidavęs arba vartoja tam tikrus vaistus). Taip pat atsižvelgiama į CAR ir paros kreivės pusiausvyrą – kartais žmogus gali turėti normalų CAR, bet padidėjusį vakarinį kortizolį, o tai rodo specifines problemas atsipalaiduojant vakare (modelis, kartais stebimas esant lėtiniam stresui), o kitas gali turėti susilpnėjusį CAR, bet normalų vakarinį lygį, o tai rodo specifinį rytinį disreguliavimą (kaip nustatyta kai kuriais perdegimo atvejais). Šie niuansai iliustruoja kontekstinį naudingumą seilių kortizolio tyrimo: jis pateikia objektyvius duomenis, kurie, interpretuojami atsižvelgiant į kasdienę rutiną, patiriamą stresą ir simptomus, gali suteikti vertingų įžvalgų apie asmens streso fiziologiją.

Tikslumo užtikrinimas – laikymasis nurodymų ir protokolo

‍Svarbus interpretavimo pagrįstumo aspektas yra užtikrinimas, kad mėginiai atspindi numatytus laiko taškus. Ypač CAR yra labai jautrus laikui. Tyrimai rodo, kad jei asmuo vėluoja paimti „pabudimo“ mėginį (pavyzdžiui, nepaima jo iškart pabudęs), CAR skaičiavimas gali būti gerokai iškraipytas. Okun ir kt. (2010) įrodė, kad daugiau nei 15 minučių vėlavimas tarp tikrojo pabudimo ir mėginio paėmimo lėmė susilpnėjusį stebimą CAR, nes kortizolis jau buvo pradėjęs nekontroliuojamai kilti (Okun ir kt., 2010). Jų tyrime asmenų, kurie mėginį paėmė vėliau nei po 15 minučių, tikroji piko vertė buvo įvertinta per mažai, o apskaičiuotas CAR buvo mažesnis nei tų, kurie mėginius paėmė iškart – tai pabrėžia, kad laiko klaidos sumažina CAR matavimo klinikinį jautrumą (Okun ir kt., 2010). Dėl šios priežasties „Sapiens“ pabrėžia būtinybę griežtai laikytis nurodymų: vartotojai yra instruktuojami (ir jiems primenama) paimti pirmąjį mėginį iškart pabudus (jei įmanoma, dar neišlipus iš lovos), o antrąjį mėginį paimti lygiai po 30±5 minučių. Šis protokolas atitinka ekspertų sutarimo gaires, kuriose pabrėžiama operatyvaus mėginių paėmimo svarba ir net siūlomi tokie metodai kaip elektroniniai dangteliai su laiko fiksavimo funkcija, skirti tikslumui patikrinti (Stalder ir kt., 2016). Laikydamasi šių gairių, „Sapiens“ užtikrina maksimalų CAR interpretavimo patikimumą. Be to, vartotojai yra instruktuojami seilių mėginius prieš miegą rinkti nuosekliu laiku (praėjus bent 60 minučių po valgio, gėrimo ar burnos higienos procedūrų), kad būtų išvengta situacinių svyravimų ar užteršimo. Taikant šias priemones, kortizolio profilio kontekstinė interpretacija – ar jis yra normalus, ar rodo disreguliaciją – gali būti atliekama su didesniu pasitikėjimu, kad duomenys atspindi tikruosius biologinius dėsningumus, o ne techninius artefaktus.

‍

‍

‍

Mėginių ėmimo namuose patvirtinimas

Mėginių ėmimo namuose pagrįstumas

Seilių mėginių rinkimas namų sąlygomis yra labai patogus ir, atliekamas pagal instrukcijas, suteikia patikimus duomenis apie kortizolio ritmus. Keletas tyrimų tiesiogiai nagrinėjo namuose atliekamų seilių kortizolio rinkimo protokolų laikymąsi ir pagrįstumą. Sørensen ir kt. (2021), pavyzdžiui, įvertino laisvo gyvenimo būdo mėginių ėmimo protokolą, labai panašų į „Sapiens“ metodiką: suaugusiųjų buvo prašoma rinkti seiles keturis kartus per dieną 3 dienas (įskaitant prabudimo momentą ir 30 minučių po prabudimo), naudojant „Salivette“ priemones. Jie nurodė 95 % laikymąsi reikalaujamo mėginių skaičiaus atžvilgiu ir 84 % laikymąsi nustatytų laiko intervalų – tai rodo, kad didžioji dauguma dalyvių sugebėjo teisingai laikytis protokolo (Sørensen ir kt., 2021 m.). Toks aukštas atitikties lygis realiomis sąlygomis patvirtina, kad motyvuoti asmenys (pavyzdžiui, dalyvaujantys „Sapiens“ sveikatingumo programoje) gali sėkmingai patys surinkti mėginius. Be to, gauti kortizolio profiliai atitiko tikėtinus rodiklius (aiškus kortizolio atsakas į pabudimą (CAR), paros ritmo mažėjimas), o kasdienis atkuriamumas buvo kiekybiškai įvertintas. Nors egzistuoja tam tikras natūralus biologinis kintamumas, Sørensen ir kt. nustatė, kad vidurkio skaičiavimas per 2–3 dienas gerokai padidina kortizolio rodiklių stabilumą (klasės vidinės koreliacijos koeficientai 3 dienų vidurkiams buvo 0,5–0,7 ribose). „Sapiens“ pasirinkimas rinkti mėginius 2 dienas (o tiems, kam neimami plaukų mėginiai – 3 dienas) suderina praktinį patogumą su patikimų duomenų poreikiu – dviejų dienų laikotarpis suteikia reprezentatyvesnį vaizdą nei viena diena, tačiau išlieka patogus vartotojui. Jei rezultatai rodo neįprastai didelį kintamumą tarp dviejų dienų, „Sapiens“ gali rekomenduoti atlikti papildomą tyrimą arba pasirinktinę trečiąją dieną modeliams patvirtinti, atsižvelgiant į žinomą HPA ašies kintamumą kasdien.

Svarbu tai, kad seilių surinkimas namuose buvo patvirtintas lyginant su prižiūrimu surinkimu laboratorinėmis sąlygomis. Tyrimai, kuriuose buvo lyginami kortizolio rezultatai, gauti namuose ir klinikoje (laikantis identiško laiko grafiko), paprastai nerodo jokių sisteminių skirtumų, priklausančių nuo aplinkos, jei tik instrukcijos yra aiškios. Ekologinis pagrįstumas atliekant mėginių paėmimą namuose iš tikrųjų yra privalumas – tai leidžia išmatuoti kortizolį dalyviui esant įprastomis kasdienėmis sąlygomis, o ne galimai stresą keliančio vizito klinikoje metu. Tai savo CAR vertinimo gairėse pažymėjo Stalder ir kt. (2016 m.): mėginių paėmimas namuose „užtikrina ekologinį pagrįstumą“ ir, laikantis tinkamų procedūrų, nesumažina duomenų kokybės (Stalder ir kt., 2016 m.). Siekdama užtikrinti mėginių vientisumą, „Sapiens“ naudoja „Salivette® Cortisol“ surinkimo priemonę, kuri supaprastina procesą (sintetinis tamponas kramtomas arba laikomas burnoje apie 1 minutę, tada įdedamas atgal į mėgintuvėlį). Šis prietaisas sukurtas užtikrinti higieną ir tikslumą naudojant be priežiūros. Dalyviams taip pat pateikiamos išsamios rašytinės instrukcijos ir priminimai apie svarbiausius dalykus: pvz., „Bent 15–30 minučių prieš kiekvieną seilių surinkimą nevalgykite, negerkite (išskyrus vandenį) ir nevalykite dantų“, kad būtų išvengta užteršimo ar praskiedimo. Laikydamasi nustatytų savarankiško surinkimo protokolų ir teikdama pagalbą vartotojams, „Sapiens“ pasiekia laboratorinio lygio patikimumą renkant mėginius namuose. Tai patvirtina platesnė literatūra ir klinikinių laboratorijų patirtis, kurios reguliariai pasikliauja pacientais, patiems namuose surenkančiais vėlyvo vakaro seilių mėginius kortizolio tyrimui (pvz., atliekant Kušingo sindromo patikrą). Šios laboratorijos nustatė, kad tinkamai instruktuoti pacientai gali surinkti mėginius, atitinkančius analitinius reikalavimus (Raff ir kt., 2012 m.). Apibendrinant galima teigti, kad „Sapiens“ įgyvendinamas seilių kortizolio surinkimas namuose yra patvirtintas metodas, duodantis pagrįstus rezultatus, kai dalyviai laikosi paprastos surinkimo procedūros.

‍

Mėginių transportavimas į laboratoriją ir stabilumas

Vienas iš svarbių klausimų atliekant biologinius tyrimus namuose – ar mėginiai išlieka stabilūs ir neužteršti transportavimo į laboratoriją metu. Įrodyta, kad seilių kortizolis yra labai stabilus įvairiomis tvarkymo sąlygomis, todėl mėginius galima siųsti paštu nenaudojant specialių konservantų.

Kortizolio molekulė yra sterolis, kuris trumpuoju laikotarpiu aplinkos temperatūroje greitai nesuyra. Klasikiniame Garde ir Hansen (2005) tyrime apie seilių kortizolio stabilumą nustatyta, kad kortizolio koncentracija reikšmingai nesumažėjo, kai seilių mėginiai buvo laikomi 5 °C temperatūroje iki 3 mėnesiųarba užšaldyti –20 °C temperatūroje iki 1 metų (Garde & Hansen, 2005). Net ir kambario temperatūroje kortizolis buvo gana stabilus trumpesniais laikotarpiais: tyrime pastebėtas lėtas, maždaug 9 % per mėnesį siekiantis sumažėjimas, kai mėginiai buvo laikomi ~20 °C temperatūroje (Garde & Hansen, 2005). Imituota 5 dienų siuntimo paštu kelionė su dideliais temperatūros ir judėjimo svyravimais neparodė reikšmingo skirtumo, palyginti su užšaldytais mėginiais, ir nustatė stiprią koreliaciją (R²≈0,92) (Clements & Parker, 1998).

Todėl tikėtina, kad kelių dienų transportavimas aplinkos temperatūroje turės nereikšmingą poveikį kortizolio lygiui – suirs tik apie 1 % ar mažiau medžiagos, o tai neviršija įprastos tyrimo paklaidos ribų. Tai patvirtina empiriniai duomenys: klinikinės laboratorijos dažnai nurodo pacientams siųsti seilių kortizolio mėginius įprastu paštu. Pavyzdžiui, Mayo klinikos gairės leidžia pacientams siųsti seilių mėgintuvėlius kortizolio tyrimui, o patvirtinimo procedūros parodė, kad rezultatai išlieka tikslūs net ir siunčiant įprastu paštu (Mayo Clinic Laboratories, 2019).

Siekiant papildomai užtikrinti stabilumą, „Sapiens“ nurodo vartotojams laikyti šaldytuve savo mėginius, jei tarp paėmimo ir išsiuntimo atsiranda vėlavimas. Iškart po kiekvieno seilių mėginio paėmimo dalyvis uždaro mėgintuvėlį ir, jei įmanoma, laiko jį buitiniame šaldytuve, kol visi mėginiai bus surinkti ir paruošti bendram išsiuntimui. Mėginių laikymas šaltai (apie 4 °C) iš esmės sustabdo bet kokį bakterijų dauginimąsi ir fermentinį aktyvumą, galintį pakeisti kortizolio rodiklius.

Kitas svarbus transportavimo aspektas – pratekėjimas arba užteršimas. „Sapiens“ tai sprendžia naudodama užsukamus, sandarius mėgintuvėlius („Salivette“ mėgintuvėliai turi patikimus dangtelius) ir pateikdama plastikinį biologinio pavojaus maišelį mėgintuvėliams. Kiekvienas mėgintuvėlis yra paženklintas paėmimo laiku, o tai labai svarbu tiksliai analizei; „Sapiens“ papildomai patikrina, ar gauti visi numatyti laiko taškai. Atvykus į laboratoriją, mėginiai užregistruojami, centrifuguojami, kad iš tamponėlio būtų išskirtos skaidrios seilės, ir užšaldomi iki tyrimo atlikimo.

Laboratorijoje atliekamas centrifugavimas taip pat padeda pašalinti bet kokias kietąsias daleles ir užtikrina, kad analizei būtų gautas homogeniškas seilių mėginys. Visa grandinė nuo namų iki laboratorijos yra sukurta taip, kad transportavimo metu neįvyktų joks reikšmingas kortizolio praradimas ar klaidingų pokyčių rizika . Realaus pasaulio duomenys patvirtina šį patikimumą: didelio masto tyrimuose (pvz., nacionalinėse streso apklausose) tūkstančiai seilių kortizolio mėginių buvo sėkmingai išsiųsti paštu dalyvių į laboratorijas, gaunant patikimus rezultatus (Sin et al., 2017).

Apibendrinant galima teigti, kad „Sapiens“ naudojama mėginių paėmimo namuose ir siuntimo paštu procedūra yra kruopščiai patvirtinta – kortizolis yra stabilus analitas per nagrinėjamus trumpus laikotarpius, o tinkamų talpyklų naudojimas, nurodymai dėl atšaldymo ir operatyvi analizė užtikrina, kad rezultatų vientisumas būtų išsaugotas nuo dalyvio namų iki galutinės laboratorinės ataskaitos.

‍

‍

Klinikinis patvirtinimas

Naudojimas endokrinologijos ir medicinos praktikoje

‍Seilių kortizolio matavimas buvo kruopščiai kliniškai patvirtintas ir dabar yra pripažinta priemonė medicinos praktikoje tam tikroms diagnozėms nustatyti. Ryškiausias pavyzdys yra Kušingo sindromas, kurio atveju vėlyvo vakaro seilių kortizolio tyrimas endokrinologų draugijų yra patvirtintas kaip pirminės atrankos testas (Nieman et al., 2008). Pacientams, sergantiems Kušingo sindromu, patikimai nustatomas neįprastai aukštas vėlyvo vakaro seilių kortizolio kiekis, atspindintis normalaus cirkadinio ritmo nuosmukio praradimą. Šio tyrimo rezultatai klinikiniuose validavimo tyrimuose buvo puikūs. Pavyzdžiui, daugiacentrio tyrimo metu nustatytas 100 % jautrumas ir 96 % specifiškumas, esant 2 ng/ml ribinei vertei, siekiant atskirti Kušingo sindromu sergančius pacientus nuo nutukusių kontrolinės grupės asmenų (Yaneva et al., 2004).

Netgi esant lengvesnėms formoms („subklinikiniam“ Kušingo sindromui), vėlyvo vakaro seilių kortizolio tyrimas pasirodė esąs naudingas diagnostikai, nors jo specifiškumas šiek tiek mažesnis. Svarbu tai, kad šie patvirtinimai rodo, jog seilių kortizolio tyrimas gali atitikti griežtus klinikinės diagnostikos reikalavimus: nustatytus etaloninius intervalus, atkuriamumą ir koreliaciją su klinikiniais rezultatais (Kušingo sindromo atveju – su hiperkortizolizmo sukeltu sergamumu). „Sapiens“ metodika iš esmės yra specializuotas to paties pamatinio matavimo taikymas – užuot diagnozavus Kušingo sindromą, ji naudojama įvertinti sutrikusius kortizolio modelius, susijusius su lėtiniu stresu ir kitomis funkcinėmis būklėmis. patikimumą paties matavimo pagrindžia sėkmingas jo taikymas diagnozuojant endokrinines ligas.

Klinikiniai tyrimai, susiję su streso sukeltomis būklėmis

‍Klinikinis pagrindimas taip pat gaunamas iš daugybės tyrimų, kuriuose nagrinėjamas seilių kortizolis esant su stresu susijusiems sindromams. Pavyzdžiui, pacientai, patiriantys perdegimą (klinikinį išsekimą) , kontroliuojamuose tyrimuose buvo lyginami su sveikais asmenimis: kaip minėta anksčiau, Pilger et al. (2018) nustatė, kad perdegimą patiriantiems pacientams kortizolio lygis dieną ir vakare buvo žymiai aukštesnis, o po gydymo jis normalizavosi. Vis dėlto, bendras kortizolio lygis perdegimo atveju įvairiuose tyrimuose rodo nevienodus modelius, kas tikriausiai atspindi neaiškius perdegimo apibrėžimus, fenotipą, mėginių ėmimo planą ir trikdančius veiksnius (Oosterholt et al., 2015) (McCanlies et al., 2020).

Kitas tyrimas, atliktas su lėtinio nuovargio sindromu (LNS) sergančiais pacientais, parodė, kad, palyginti su sveikais asmenimis, LNS sergantiems asmenims kortizolio atsakas pabudus buvo silpnesnis, o kortizolio išsiskyrimas dienos metu – mažesnis (Roberts et al., 2004), kas rodo galimą hipoaktyvią HPA ašies išraišką.

Tuo tarpu didžiosios depresijos, ypač melancholinės depresijos, atveju tyrimai dažnai rodo padidėjusį vakarinį seilių kortizolio kiekį ir mažiau ryškų paros ritmo mažėjimą, o tai atitinka HPA ašies hiperaktyvumą (Huber et al., 2006). Šios išvados įvairiuose klinikiniuose kontekstuose patvirtina, kad seilių kortizolio profiliai nėra tik teoriniai konstruktai, o buvo pastebėti kaip skiriamieji realių pacientų grupių bruožai. Tai suteikia pagrindo „Sapiens“ naudoti kortizolio profilį kaip biomarkerį galimoms problemoms nustatyti. Pavyzdžiui, jei „Sapiens“ vartotojo rezultatai atitinka tuos, kurie stebimi perdegusiems pacientams (pvz., aukštas vakarinis kortizolis ir (arba) žemas CAR), tai suteikia biologiškai objektyvų įrodymą, atitinkantį tai, kas žinoma iš klinikinių perdegimo tyrimų. Tai gali padidinti gydytojo pasitikėjimą teikiant rekomendacijas ar atliekant tolesnį vertinimą.

Integracija su daugiarūšiais vertinimais

‍Verta paminėti, kad seilių kortizolio validacija apima ir jo integravimą su kitais rodikliais. Klinikinėje praktikoje ir moksliniuose tyrimuose kortizolio lygis dažnai interpretuojamas kartu su simptomais ar kitais biomarkeriais. Pavyzdžiui, širdies ritmo kintamumas (ŠRK) ir seilių kortizolis streso tyrimuose dažnai vertinami kartu, o kartu jie suteikia išsamesnį vaizdą apie autonominės nervų sistemos ir HPA ašies veiklą. „Sapiens“ laikosi panašios filosofijos, derindama kortizolio profiliavimą su tokiais duomenimis kaip ŠRK ir psichologiniai klausimynai. Validuotas seilių kortizolio pobūdis užtikrina, kad ši dėlionės dalis yra patikima. Kai stebimas kortizolio modelis nesutampa su kitais rodikliais, tai skatina atidžiau pasigilinti – pavyzdžiui, jei subjektyviai jaučiamas stresas yra didelis, o kortizolio ritmas atrodo visiškai normalus, galima kelti klausimą, ar čia neveikia kiti veiksniai (pvz., suvokimas arba galbūt didelis HPA ašies atsparumas). Ir atvirkščiai, nenormalus kortizolio modelis žmogui, kuris nepraneša apie didelį stresą, gali įspėti apie paslėptus stresorius ar kitas medicinines problemas (pavyzdžiui, subklinikinį hiperkortizolizmą ar miego apnėją, kurie gali padidinti kortizolio kiekį). Tokiu būdu seilių kortizolis veikia kaip patikimas ir nepriklausomas žymuo , kuris suteikia klinikiniams vertinimams objektyvumo.

Apribojimai ir klaidinantys veiksniai

‍Joks biomarkeris neturi trūkumų, o seilių kortizolio klinikinis validavimas apima ir jo apribojimų supratimą. Vienas iš apribojimų yra cirkadinis kintamumas – vienas kortizolio rodmuo turi ribotą reikšmę; dienos eigos modeliai (tokie, kokius matuoja „Sapiens“) yra kur kas informatyvesni. Be to, ūmūs įvykiai (prastas miegas, liga, alkoholio vartojimas išvakarėse) gali laikinai sutrikdyti kortizolio lygį. Todėl klinikinė interpretacija turi atsižvelgti į naujausią kontekstą. Kitas gerai žinomas aspektas yra burnos sveikata ir mėginio vientisumas. Jei seilių mėginys užterštas krauju (pavyzdžiui, dėl dantenų kraujavimo), kortizolio rodmuo gali būti dirbtinai padidintas, nes kraujyje kortizolio koncentracija yra apie 100 kartų didesnė nei seilėse. Dėl šios priežasties klinikiniai protokolai rekomenduoja vengti valytis dantis ar stipriai kramtyti tamponą. Dalyviai, sergantys dantenų uždegimu ar turintys burnos pažeidimų, turi būti atsargūs; priešingu atveju klaidingai aukštas kortizolio lygis gali būti neteisingai interpretuotas. „Sapiens“ tai sušvelnina pateikdama aiškias instrukcijas (jei reikia, praskalauti burną vandeniu, nerinkti mėginio, jei yra aktyvus kraujavimas) ir naudodama sintetinio tampono dizainą, kurio nereikia stipriai kramtyti. Vaistų vartojimas yra dar vienas veiksnys: tam tikri vaistai (pavyzdžiui, gliukokortikoidai ar net kai kurie didelių dozių progestinai) gali slopinti arba didinti kortizolio kiekį. Klinikiniame vertinime, nustatant normas, asmenys, vartojantys tokius vaistus, yra pašalinami iš tyrimo arba į jų vartojimą atsižvelgiama. „Sapiens“ taip pat klausia vartotojų apie vartojamus vaistus, kad rezultatus būtų galima tinkamai interpretuoti (pavyzdžiui, geriamasis hidrokortizonas gali visiškai išlyginti paros ritmą).

Galiausiai, psichologinis ir elgsenos laikymasis nurodymų yra netiesioginis trikdantis veiksnys – jei dalyvis nukrypsta nuo protokolo (paima rytinį mėginį valanda vėliau arba pamiršta paimti mėginį ir paima jį kitą dieną), duomenų patikimumas sumažėja. Moksliniuose tyrimuose tai sprendžiama pašalinant dienas, kurios neatitinka tikslumo kriterijų (Stalder et al., 2016). „Sapiens“ programoje pabrėžiame švietimą ir patogumą vartotojui, kad užtikrintume kuo geresnį laikymąsi, o bet kokios kortizolio duomenų anomalijos (pvz., biologiškai neįtikėtinas šuolis ar kritimas) yra papildomai tikrinamos konsultuojantis su dalyviu (kartais dalyvis pripažįsta: „O, tą mėginį paėmiau vėliau“). Šis pragmatiškas požiūris užtikrina, kad „Sapiens“ pateikiamas kortizolio profilis būtų kuo kliniškai pagrįstas ir atspindėtų tikrąją fiziologiją. Žinomi apribojimai yra skaidriai komunikuojami: pavyzdžiui, vartotojai informuojami, kad kortizolio lygis natūraliai svyruoja ir kad dvi dienos yra tik momentinis vaizdas (nors ir reikšmingas). Jei rezultatai yra ribiniai ar neaiškūs, galima atlikti pakartotinį tyrimą, panašiai kaip gydytojas gali pakartoti ribinį laboratorinį tyrimą.

‍

‍

Santrauka

Apibendrinant galima teigti, kad „Sapiens“ įdiegtas seilių kortizolio matavimas remiasi tvirtu moksliniu ir klinikiniu pagrindu. Jo analitinis patikimumas yra aukštas, koreliacija su svarbiomis sveikatos būklėmis yra gerai dokumentuota, o naudingumas namų sąlygomis – įrodytas. Nors „Sapiens“ atsižvelgia į apribojimus (cirkadinę dinamiką, tinkamą mėginių ėmimo techniką ir individualius skirtumus), šis biomarkeris naudojamas moksliškai atsakingai – siekiant kortizolio ritmo subtilybes paversti naudingomis įžvalgomis apie sveikatą, be jokio perdėjimo. Tonas ir interpretacija išlieka pagrįsti įrodymais ir atsargūs, atitinkantys tai, kaip gydytojas ar klinikos mokslininkas vertintų antinksčių funkcijos tyrimą. Tai užtikrina, kad „Sapiens“ kortizolio profiliavimas pelno medicinos specialistų, klinikinių mokslininkų ir informuotų suinteresuotųjų šalių pasitikėjimą, demonstruodamas tikslumą, pagrįstumą ir supratimą apie HPA ašies sudėtingumą žmogaus sveikatoje.

‍

‍